GenXion® Transfection Reagent 2000

品名：GenXion® Transfection Reagent 2000

货号：GXL2000 

规格：1ml 

价格：￥600元

产品简介

GenXion® Transfection Reagent 2000是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA 和RNA)转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

适用范围: 贴壁细胞和悬浮细胞（晡乳动物细胞系）的转染。

保存条件

4-8℃ 保存一年。（避免冷冻）

质粒DNA的转染

对大多数细胞来说，DNA(μg)与GenXion® Transfection Reagent 2000 (μl)的比例为 1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。

1. 以24 孔板为例

贴壁细胞：转染 diyitian ，用500 μl 不含 kangshengsu 的培养基接种0.5〜2X105  细胞，使之 diertian 能达到70-90%汇合。

悬浮细胞：在准备DNA-GenXion® 复合物之前，用500 μl 不含 kangshengsu 的培养基接种4〜8X105  细胞即可。

2. 对每个转染样品，进行以下操作

a. 在Eppendorf 管里分别加入50 μl 〇pti-MEM I Reclipped Serum Medium 和0.8 μg DNA 轻柔混匀，制成DNA 稀释液。

b. 在另一个Eppendorf 管里分别加入50μl OpTi-MEMI Reclipped Serum Medium 和2.0 μl GenXion®(注意用前先混匀)，轻柔混匀制成GenXion® 稀释液，室温静置5 分钟。

c. 将DNA稀释液和GenXion® 稀释液混合，轻柔混匀，室温静置20 分钟，形成DNA-GenXion® 复合物。DNA-GenXion® 复合物在室温下可稳定存在6 小时。

3. 将DNA-GenXion®  复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。

4. 在37C CO2 培养箱中培养4-6 小时后更换培养基，继续培养18〜48 小时。

5. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24 小时后将细胞按照1:10 或更高的比例接种到新鲜培养基中，diertian 加入选择性培养基进行筛选。

质粒DNA转染的优化

为达到 zuigao 的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5〜1:5 的范围内优化 DNA (μg)和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例。