多重荧光试剂盒 Plus（双标三色）

多重荧光试剂盒 Plus（双标三色）

货号：GK500523

规格：20T /100T

价格：2800元/100T

原理介绍

        酪酰胺信号放大(TSA ，Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶（ HRP） 对 靶蛋 白进 行标 记的 酶学 检测 方法 ， 类 似常 规免 疫组 化的 DAB  显 色方 法， TSA  技 术同 样采 用 HRP 标记的二抗，同样有对应的“显色”步骤（ HRP 催化加入反应体系的酪胺荧光素底物，产生活化荧光底物， 活化底物 可 与抗 原 上 的 酪 氨酸 等 残 基 共价 结 合 ，使 样品 上 稳 定 的共 价 结 合 酪胺荧光素 。之 后 用 热 修 复 法 或 者 抗 体洗脱液洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP 复合物， 重复下一种一抗- HRP二抗来第二轮孵育，换另一种酪胺荧光素底物，如此往复就可实现多重标记。

        TSA  详细原理是利用酪胺 Tyramide  的过氧化物酶反应(酪胺盐在 HRP  催化 H202 下形成共价键结合位点) ，产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合， 这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积，结果使其检测信号得到 10- 100 倍增强。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP（ 而不是直接偶联荧光素） ， 来催化后续添加入体系的非活性荧光素。 荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化， 跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素 稳定结 合。 然 后微波 或煮沸 或者水 浴等热 修复处 理，前一 轮非共价结合的抗体被洗掉， 共价结合的荧光素 稳定共 价结合 在样本 切片蛋 白上。 再换个 一抗来 第二轮 孵育， 周而复始。 等到所有抗体孵育结束， 荧光素都结合好后， 最后去检测结果。 由于每次体系中都只有单一抗体孵育， 因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说，如果用 TSA 技术， 同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。 搭配同一支抗兔的 HRP  二抗就可以进行 实验， 而且信号 放大的 倍数大 大增强 。 本公 司开发 的试剂 盒具体酪胺荧光染料为以下其中一种或者多 种：TYR-480Plus ，TYR-520Plus ，TYR-570Plus ，TYR-620Plus ，TYR-690Plus ，TYR-780Plus 。此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。可以实现单标、双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能，极大丰富了此试剂盒的内涵。

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