GENRED 核酸染料(10,000× 水溶液)
货号:G001
规格:0.5ml
GENRED核酸染料特点
1、 无毒性:GENRED 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,
该染料的诱变性远远小于EB。
2、 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3、 稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4、 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
5、 操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗,
即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6、适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;
可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
7、 与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察
EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是 GENRED 不能被 488 nm 氩离子
激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用
GENGreen(Cat# 011或 012),它和 SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
GENRED使用方法简介
1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)
(1) 制胶时加入GENRED 核酸染料(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL GENRED10,000× 储 液,以此比例类推)。
(2) 按照常规方法进行电泳。
注意事项:
1、此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做 100块 50mL的胶。
2、 由于 GENRED 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转
以保证染料充分混匀。也可以选择将 GENRED 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备
琼脂糖凝胶。GENRED兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3、如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明
问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
4、此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) 用 H2O将 GENRED 10,000× 储液稀释约 3,300倍到 0.1M NaCl中,制成 3× 染色液。
(例如将 15μL GENRED10,000× 储液和 5mL 1M NaCl加到 45mL H2O中)。
(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30min 左右,
最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含 3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于 30min 到 1h,
并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项:
1、用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3次左右
2、 3× GENRED染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
特别提醒:
1、 如果您使用的是紫外成像仪,请选择 GENRED;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择 GENGreen。
2、在极少数情况下,质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。